التشخيص الوراثي قبل الزرع (PGD)

• خلية الإنسان الطبيعية تحتوي على 46 صبغية أو 23 زوجًا من الصبغيات. هذه الصبغيات هي هياكل شبيهة بالخيوط تقع في وسط كل خلية أو نواة وتحمل المعلومات الوراثية.

• الأزواج الصبغية 22 تسمى صبغيات ذاتية وهي متماثلة في الرجال والنساء. الزوج الصبغي الثالث والعشرون يُعرف بصبغيات الجنس. النساء عادةً ما تحملان صبغتي جنس متماثلتين تُسمى صبغة X، بينما الرجال عادةً ما يحملون صبغتي جنس مختلفتين، وهما الصبغة X والصبغة Y.

• الحيوانات المنوية والبويضات تحتوي على نصف عدد الصبغيات الإجمالي البالغ 46 صبغية أو 23 صبغة لكل منهما.

• الجنين المخصب الطبيعي يتكون من خلال اندماج 23 صبغة من البويضة و23 صبغة من الحيوان المنوي.

• انقسام الخلايا غير الطبيعي في الحيوانات المنوية أو البويضات قد يؤدي إلى وجود عدد أكبر أو أقل من الصبغيات من العدد الطبيعي البالغ 23. لذلك، أي جنين ينشأ من هذه الحيوانات المنوية أو البويضات سيحمل صبغيات إضافية أو ناقصة، وهذه الحالة غير الطبيعية تُشار إليها بالأنيوبلويديا.

• في حوالي 70% من حالات الإجهاض المتكرر، يتم التعرف على أعداد غير طبيعية (أنيوبلويديا) للصبغيات.

• بعض أكثر الشوائب الصبغية شيوعًا التي تُعثر عليها في حالات الإجهاض تشمل ثلاثية الصبغة 16 (3 نسخ من الصبغة 16)؛ ثلاثية الصبغة للصبغات 22، 21، 15، 18 أو 13؛ ثلاثية الصبغات (3 نسخ لكل الصبغات)؛ وشوائب في صبغات الجنس.

•الأجنة ذات الشوائب الصبغية عادة ما تفشل في التثبيت في الرحم، وقد لا تتطور الزرعات بشكل طبيعي أو يمكن حدوث إجهاضات في بعض الحالات. في بعض الأحيان، يمكن أن تستمر الحملة حتى الشهور الأخيرة وتنتج أطفالًا ذوي شوائب صبغية مثل متلازمة داون.

• نسبة الأجنة ذات الشوائب الصبغية التي ينتجها كل زوج تتفاوت اعتمادًا على حالتهم السريرية.

• عوامل مثل سن الأم المتقدم (> 35 سنة)، عدد دورات التخصيب في المختبر الفاشلة، والإجهاضات أثناء الحمل الطبيعي، وجودة الحيوانات المنوية تؤثر جميعها على نسبة الأجنة ذات الشوائب الصبغية.

• أي انحراف عن وجود نسختين من كل صبغة يعتبر غير طبيعي. إذا تم التعرف فقط على إحدى الصبغتين من الصبغتين، يُعتبر الجنين أحادي الصبغة، وإذا تم التعرف على 3 صبغات يُعتبر ذلك ثلاثي الصبغة. هذه الحالتين غير طبيعيتين وغير مناسبتين لنقل الأجنة.

• بالنسبة لـ PGD-AS، يتم زرع الأجنة التي تم إنشاؤها بواسطة تخصيب البويضة في المختبر لمدة 3 أيام لتنمو بشكل مثالي إلى مرحلة الخلية البالغة 8 خلية. في هذا الوقت، يتم إزالة خلية أو خليتين عادةً عن طريق إجراء ثقب في الغلاف الخارجي للجنين. يُسمى هذا الإجراء استئصال الجنين. يتم إعادة الجنين الذي تم استئصاله إلى الزرع حتى الحصول على النتيجة لتلك الخلية أو الخلايا عادةً في اليوم الخامس بعد استخلاص البويضة.

• إزالة خلية واحدة أو خليتين من جنين يحتوي على ثمانية خلايا لا تؤثر على تطور الجنين.

• من المهم أن يكون الجنين الذي سيتم استئصاله له على الأقل 5 خلايا وأن يكون هناك تجزئة أدنى في اليوم الثالث من التطور الجنيني. إذا كان الجنين يحتوي على عدد قليل جدًا من الخلايا، فإن استئصال الخلية قد يعرض استدامة الجنين للخطر.

• المواد النووية من الخلية التي تم استئصالها يتم إرسالها إلى مختبر مرجعي. يقوم المختبر المرجعي بأداء إجراء يُسمى “تحاليل الوجود اللمعاني بالأشعة فوق البنفسجية (FISH)” لتحديد حالة الصبغيات لكل خلية.

• مختبر الإشارة الخاص بنا يستخدم مزيجًا من مسبارات FISH في تحاليل هجينة واحدة أو اثنتين متتاليتين. الصبغيات الممكن اختبارها تشمل الصبغيات 13 و 15 و 16 و 18 و 21 و 22 و X و Y. تُعثر عادةً على الشوائب في هذه الصبغيات في حالات الإجهاض والمواليد الحية غير الطبيعية.

• يجب أن تُظهر الخلية الطبيعية نسختين من إشارات FISH لكل من الصبغيات المُرقَمة (13 و 18 و 21)، وإما إشارتين X للإناث أو إشارة واحدة X وإشارة واحدة Y للذكور.

• قد تكون هناك حالات حيث لا يمكن الحصول على النتيجة أو تكون غير صحيحة. بعض هذه الحالات تشمل:

• إذا فقدت الخلية أثناء تثبيتها أو تم تمزق النواة، فلن يتم الحصول على نتيجة.
• في بعض الأحيان، قد لا تنتشر الصبغيات في النواة بشكل صحيح وتكون متراصة فوق بعضها البعض، مما قد يقلل من عدد الصبغيات ويؤدي إلى نتيجة خاطئة.
• قد يفشل مسبار FISH في الارتباط بصبغية ما، مما يشير إلى وجود صبغية مفقودة.
• إذا تمت عملية استئصال الجنين عندما تكون إحدى الخلايا في منتصف التقسيم الخلوي، فإن النتيجة قد تظهر بصورة تحتوي على نواةين وأربع مجموعات من الصبغيات، ويمكن أن يكون من الصعب تفسير تحليل FISH من هذه الخلايا.

• العديد من العوامل تؤثر على نجاح دورة PGD/IVF. تشير البيانات الحالية إلى أن دورات PGD تكون الأكثر نجاحاً عند إنشاء 8 أو أكثر من الأجنة بواسطة تخصيب البويضة وعلى الأقل 5 منها ذات نوعية جيدة حسب تصنيف المختبر الجنيني بناءً على عدد الخلايا والتجزئة وتوحيد حجم الخلية.

• عادةً ما لا يزيد PGD من معدلات الحمل، ولكنه يقلل من حدوث الإجهاض وحدوث الحمل الثلاثي الصبغي (ثلاثي الصبغة).

• PGD يكون الأكثر نجاحًا في حالات المرضى الذين يمتلكون أكثر من 3 أجنة لا تظهر فيها شوائب وعلى الأقل منهم اثنان تطورا إلى مرحلة الجنين المرمَّى. PGD لاختبار الجين الفردي: يُشير هذا إلى المرضى حيث يحمل الشريكان جينًا لاضطراب ذو طابع متنحي ذاتيًا أو قد يحمل أحد الشريكين جينًا لاضطراب ذو طابع متنحي ذو طابع متنحي وهذا يزيد من خطر إنجاب طفل يعاني من اضطراب جيني شديد، مثل داء دوشين لتصلب العضلات، التليا الكيسي، تاي ساكس إلخ. حاليًا، تتضمن هذه القائمة أكثر من خمسين اضطرابًا. تشمل هذه الإجراءات اختبارًا مسبقًا لاكتشاف الطفرة الجينية في المريض والشريك حتى يمكن إنتاج مسبار جيني. هناك عدة أسباب ممكنة لعدم تحقيق النجاح في التعرف على الجين بنجاح أو تحقيق الحمل بنجاح. تشمل هذه الأسباب:

• إمكانية فشل تكبير الجين المعني أو تدهور المواد النووية التي لا تسمح بإشارة واضحة للحمض النووي.

• PGD لاختبار الجين الفردي يمكن أن يكتشف فقط الأجنة التي تحمل الطفرة بغض النظر عن إمكانية التثبيت للجنين. PGD لاختبار الانتقال الصبغي أو الشوائب الهيكلية: ينطوي الانتقال الصبغي على إعادة ترتيب مادة الصبغي بحيث تتواجد بعض المواد الوراثية من صبغة واحدة على صبغة أخرى. يُعرف هذا بانتقال “متوازن” حيث يتواجد كل من المواد الوراثية الطبيعية.

• إذا كان أحد الشريكين يحمل إعادة ترتيب متوازنة للصبغيات، فيمكن له أو لها أن ينتجوا حيوانات منوية أو بويضات يمكن أن تحتوي على قطعة إضافية أو ناقصة من مادة صبغي معينة. يمكن أن تؤدي هذه الحالات إلى تكوين حملات تحمل “انتقال غير متوازن” حيث يوجد إما زيادة أو نقص في إجمالي المادة الوراثية. يمكن أن يؤدي ذلك إلى فشل في تطوير الجنين في مراحل مبكرة، وفقدان متكرر للحمل، أو ولادة طفل يعاني من عيوب عقلية و/أو جسدية.

• ليست جميع انتقالات أو إعادات الترتيب الهيكلية يمكن اختبارها بواسطة PGD. سيحتاج مختبر الإشارة إلى تحليل كاريوتايب من دم كل من الشريكين قبل بدء دورات تخصيب البويضة للتحقق من إمكانية إجراء اختبار PGD لتلك الشذوذ.

• على الرغم من أن الأدلة الطبية تظهر أن PGD في الأزواج الذين يحملون انتقالات صبغية يساعد في تقليل فقدان الحمل، إلا أنه لا يمكنه القضاء على خطر الإجهاض بسبب عوامل أخرى.

• يمكن أن يتم إجراء PGD للانتقال بالاشتراك مع فحص عدم التوازن في عدد الصبغيات باستخدام عدد محدود من مسبارات FISH.